تولید سازه ژنی نوترکیب حاوی قطعه کد کننده هپسیدین انسانی

چکیده مقدمه:هپسیدین یک پپتید ضد میکروبی غنی از سیستئین است که شکل پیش ساز آن از کبد ترشح می شود. این پپتید علیه دامنه وسیعی از باکتری ها، ویروس ها و قارچ ها عمل می کند. هپسیدین همچنین به عنوان اصلی ترین تنظیم گر هومئوستاز آهن بدن شناخته شده است. امروزه تلاش های گسترده ای برای تولیدهپسیدین صورت گرفته است. یکی از سیستم های بیانی یوکاریوتی مورد استفاده برای تولید هپسیدین ، سیستم بیانی باکلوویروس می باشد. تولید سازه ژنی نوترکیب یکی از اصلی ترین مراحل در مسیر تولید هپسیدین در این سیستم بیانی است. روش بررسی: ابتدا rna تام از سلول های رده hepg2 به عنوان سلول تولید کننده هپسیدین استخراج شده و پس از سنتز cdna کل، قطعه مربوط به هپسیدین انسانی توسط پرایمر های اختصاصی هپسیدین به روش pcr تکثیر شد. در مرحله بعد این قطعه درون ناقل ptz57r/t کلون شد. در پایان قطعه مربوطه به روش برش آنزیمی توسط آنزیم های bamhi و ecori به درون محل ورود ژن در ناقل pfast bacht b منتقل شد. یافته ها: قطعه کد کننده هپسیدین انسانی به طور صحیح درون ناقل ptz57r/t کلون شده و مراحل ساب کلونینگ درون ناقل pfast bac ht b با موفقیت انجام شد. حضور باند 274 جفت بازی حاصل از تکثیر pcr و برش آنزیمی نشان دهنده صحت مراحل انجام کار بود. نتیجه گیری: بر اساس جستجوهای انجام شده این مطالعه نخستین مورد از تولید سازه ژنی نوترکیب واجد قطعه کد کننده هپسیدین کامل انسانی در کشور است. سازه های ژنی نوترکیب حاصل از این مطالعه می تواند به منظور تولید فرم کامل هپسیدین انسانی در مطالعات آینده مورد استفاده قرار گیرد. واژه های کلیدی : سازه ژنی، هپسیدین ، آهن